GeneRulor Transposase是一种由分子定向进化技术优化产生的高活性转座酶，其来源于大肠杆菌。该酶能够高度特异地识别含有嵌合末端序列（ME）的DNA片段，并与之结合形成高度稳定的转座体复合物（Transposome）。此复合物能够高效地将所携带的 DNA 片段随机整合到目标基因组序列中。通过这一机理，GeneRulor Transposase极大地简化了传统 DNA 操作中繁琐的克隆、酶切、连接等步骤，显著提升了 DNA 片段整合与重组的效率。其操作简便、反应快速、背景低的特点，使其成为新一代测序文库构建，特别是高通量、自动化建库流程中的理想工具。该产品不仅提高了建库成功率与均一性，也为大规模功能基因组筛选、结构变异检测、基因表达谱分析等研究提供了关键技术支持，是现代分子生物学与基因组学研究的核心试剂。
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GeneRulor Transposase
1. 产品简介
GeneRulor Transposase是一种经过分子定向进化改造的高活性转座酶，其来源是大肠杆菌（E. coli）中的Tn5转座酶。通过蛋白质工程优化，其转座效率相较于天然转座酶有了显著提升。该酶能够高特异性地识别含有嵌合末端序列（Mosaic End sequence，ME）的DNA片段，并与之组装成预先包埋接头的即用型转座体复合物（Transposome），这种复合物可立即用于转座反应，简化了实验流程。
其作用机制在于，转座酶能识别转座子末端反向重复序列并形成突触复合体，在镁离子（Mg²⁺）存在下，同时完成双链DNA的切割与接头连接。这一特性使其能高效地将所携带的 DNA 片段随机插入目标序列，并对不同 GC 含量的DNA样本均表现出较低的序列偏好性，保证了转座反应的广泛适用性与稳定性。因此，该酶特别适用于高通量测序文库构建等分子生物学应用。
2. 产品特点
（1）超高活性：经过蛋白质工程优化，转座效率较天然酶显著提高。
（2）广谱底物兼容性：对不同 GC 含量的DNA样本均表现出极低的序列偏好性。
（3）高特异性：精确识别 ME 序列，最大程度减少非特异性反应。
（4）批间一致性：严格的质控体系确保批次间性能稳定。
3. 应用领域
3.1 细菌转座子突变体文库构建
（1）转座体形成：GeneRulor Transposase与含 ME 序列的 DNA 片段在 Assemble Buffer 中孵育。
（2）电转化导入：反应产物电转入受体菌株，通过抗生素筛选获得转座子插入突变体。
（3）突变体库构建：收集独立克隆形成突变体池，可直接用于功能筛选或进行后续NGS分析。
图1. 转座子设计示意图
3.2 二代测序（NGS）文库构建
GeneRulor Transposase 是一种用于构建二代测序 DNA 文库的高效工具。其特点在于利用 GeneRulor Transposase 二聚体的特殊转座机制，能够同时完成双链 DNA 的切割和接头连接两个步骤。这种酶具有快速反应能力，且所需样品量少，可在单一反应中将DNA 打断并在两端添加特定接头序列。这一简化的‘’一步法‘’标记方法大大优化了实验流程，不仅节省了操作时间，还降低了实验成本，因此在 DNA 测序文库构建领域得到广泛应用。
图2. 构建二代测序文库工作原理图
参考文献
[1] Li N, Jin K, Bai Y, Fu H, Liu L, Liu B. Tn5 Transposase Applied in Genomics Research. Int J Mol Sci. 2020 Nov 6;21(21):8329. doi: 10.3390/ijms21218329.
[2] Zhang H, Lu T, Liu S, Yang J, Sun G, Cheng T, Xu J, Chen F, Yen K. Comprehensive understanding of Tn5 insertion preference improves transcription regulatory element identification. NAR Genom Bioinform. 2021 Oct 27;3(4):lqab094. doi: 10.1093/nargab/lqab094.