GeneRulor pG-Transposase 是一种经蛋白质工程优化、融合了 Protein G 结构域的转座酶。它在完全保留DNA切割与连接活性的同时,显著拓宽并增强了抗体结合谱与亲和力,对兔、鼠、山羊等多种物种的抗体具有广泛高亲和力,尤其在小鼠 IgG1 亚型上表现出卓越性能,弥补了传统 Protein A 在此类应用中的不足。作为改良版 CUT&Tag 等技术的核心元件,它能通过特异性一抗引导,精准靶向染色质目标区域,并在该位点高效完成 DNA 原位片段化与测序接头标记。这一特性使其在表观遗传学分析中展现出更高的通用性、灵敏度与信噪比,特别适用于使用小鼠 IgG1 抗体、需跨物种兼容性的实验,或对稀有细胞、低丰度靶点进行高分辨率、高特异性分析的场景,为染色质可及性、转录因子结合及组蛋白修饰等研究提供了更灵活、可靠且强大的工具。
GeneRulor pG-Transposase
1. 产品简介
GeneRulor pG-Transposase是一种通过蛋白质工程技术将 Protein G 结构域与转座酶融合而成的工具。与GeneRulor pA-Transposase相比,GeneRulor pG-Transposase的设计进一步拓展了抗体结合范围,其Protein G结构域不仅对兔、鼠、山羊等多物种来源的抗体具有广泛亲和力,更在结合某些关键亚型,尤其是小鼠IgG1,方面表现出显著优势,从而实现了对更广泛抗体类型的强效、稳定结合。这一特性使GeneRulor pG-Transposase在CUT&Tag与CUT&RUN等靶向染色质分析技术中具备更高的通用性和实验适应性。
该工具完整保留了转座酶原有的DNA切割与连接功能,同时借助Protein G增强的抗体结合能力,能够灵活适配不同宿主来源与亚型的抗体。因此,GeneRulor pG-Transposase为表观遗传学、染色质互作及转录调控研究提供了更全面、更可靠的解决方案,特别适用于使用小鼠IgG1类抗体或需要跨物种兼容性的实验体系。
2. 产品特点
(1)广谱抗体亲和性:融合protein G,对多种IgG抗体亚型均有高亲和力。
(2)增强型靶向能力:相比GeneRulor pA-Transposase,具有更高的抗体结合稳定性和特异性。
(3)超低样本需求:可有效处理低至500个细胞样本。
(4)超高灵敏度:对染色质修饰和转录因子结合位点具有亚纳米级分辨率。
(5)低背景噪音:优化的酶学性能显著降低非特异性切割,提高信噪比。
3. 应用领域
3.1 表观遗传学研究
增强型CUT&Tag技术:GeneRulor pG-Transposase通过其优异的抗体亲和性能,实现对感兴趣区域的超精准标记和高效文库构建。其工作原理是利用 Protein G与IgG抗体 Fc 段的强相互作用,将转座酶更牢固地引导至目标位点,实现极高特异性的 DNA 片段化和接头连接。这种技术特别适合研究极低丰度的转录因子结合位点和罕见的组蛋白修饰,能够在更低的细胞投入量条件下获取高质量数据,为单细胞水平的表观基因组学分析提供可能。

图1. GeneRulor pG-Transposase用于CUT&Tag实验流程图
3.2 二代测序(NGS)文库构建
GeneRulor pG-Transposase是一种用于构建二代测序DNA文库的高效工具。其特点在于利用GeneRulor pG-Transposase二聚体的特殊转座机制,能够同时完成双链DNA的切割和接头连接两个步骤。这种酶具有快速反应能力,且所需样品量少,可在单一反应中将DNA打断并在两端添加特定接头序列。这一简化的‘’一步法‘’标记方法大大优化了实验流程,不仅节省了操作时间,还降低了实验成本,因此在DNA测序文库构建领域得到广泛应用。

图2. 构建二代测序文库工作原理图
参考文献
[1] Dancette OP, Taboureau JL, Tournier E, Charcosset C, Blond P. Purification of immunoglobulins G by protein A/G affinity membrane chromatography. J Chromatogr B Biomed Sci Appl. 1999 Feb 19;723(1-2):61-8. doi: 10.1016/s0378-4347(98)00470-8.
[2] Kaya-Okur HS, Wu SJ, Codomo CA, Pledger ES, Bryson TD, Henikoff JG, Ahmad K, Henikoff S. CUT&Tag for efficient epigenomic profiling of small samples and single cells. Nat Commun. 2019 Apr 29;10(1):1930. doi: 10.1038/s41467-019-09982-5.