GeneRulor Nanobody-Tn5 Transposase
GeneRulor Nanobody-Tn5 Transposase是一种将特异性纳米抗体与高活性Tn5转座酶偶联的融合蛋白。其纳米抗体模块约15 kDa,体积较传统抗体减小约90%,兼具皮摩尔级高亲和力与优异热稳定性,可高效识别小鼠或兔源一抗IgG Fc片段。该设计使Tn5转座酶无需二抗即可直接靶向一抗结合的染色质抗原位点,同步完成原位DNA切割与带索引接头的插入,极大简化流程。该技术可预装不同Barcode接头,实现单次实验对多靶点(如H3K27ac与H3K27me3)的并行检测,提升通量与信噪比。它已成功应用于单细胞多模态表观遗传分析,可同步解析胞内染色质状态与胞表蛋白标记,为免疫、发育、肿瘤及疾病机制等领域的精准高分辨率研究提供强大工具,推动了向单细胞、多维度整合分析的范式变革。
GeneRulor Nanobody-Tn5 Transposase
1. 产品简介
GeneRulor Nanobody-Tn5 Transposase是通过蛋白质工程技术构建的融合蛋白,将特异性纳米抗体与超活性Tn5转座酶偶联,可高效识别小鼠或兔来源的一抗 IgG Fc 片段。其纳米抗体模块仅15 kDa,体积较传统抗体减小90%,兼具高亲和力(皮摩尔级结合能力)与优异的热稳定性。该创新设计使 Tn5 转座酶能够直接靶向一抗结合位点,在染色质切割同时插入含独特索引的测序接头,无需二抗孵育步骤,显著简化实验流程。通过预装载不同Barcode接头,单次实验即可实现多靶标并行检测(如H3K27ac/H3K27me3等组蛋白修饰),信噪比显著提升。该技术已成功应用于单细胞多模态表观遗传分析,支持染色质状态与细胞表面蛋白的同步解析,为免疫学、神经发育及疾病机制研究提供高分辨率工具。
2. 产品特点
(1)超高亲和力与特异性:纳米抗体与靶标IgG的亲和力优于传统Protein-A/G,可实现染色质标记的高精度定位。
(2)卓越的稳定性:在宽温域及不同pH条件下保持高活性,确保实验结果稳定可靠,适用于各类复杂样本。
(3)灵活的多重化检测:借助物种特异性纳米抗体,单次实验即可同步分析多种组蛋白修饰或转录因子结合位点。
(4)小尺寸与低背景干扰:纳米抗体分子量仅15 kDa,具有优异组织穿透能力,且非特异性结合极低,信噪比显著提升。
(5)即用型单细胞兼容设计:可预装载Barcode接头,可直接用于10x Genomics等单细胞平台,流程简洁,灵敏度覆盖单细胞水平。
3. 应用领域
NTT-seq技术:GeneRulor Nanobody-Tn5 Transposase核心应用于表观遗传学前沿研究,尤其通过NTT-seq实现单细胞分辨率下的多模态染色质分析。其工作原理基于纳米抗体特异性结合不同物种或IgG亚型的一抗(如抗小鼠/兔IgG),引导Tn5转座酶靶向组蛋白修饰(如H3K27ac、H3K27me3)或转录因子结合位点,完成DNA原位片段化与条形码接头插入。该方法具备高灵敏度(可检测低至单细胞水平)、低背景干扰及多重化优势,支持同步解析多个染色质标记。

图1. GeneRulor Nanobody-Tn5 Transposase用于CUT&Tag实验流程图
参考文献
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