GeneRulor NGS DNA 纯化磁珠
GeneRulor NGS DNA 纯化磁珠基于固相载体可逆化固定原理开发，专为高通量测序文库构建中DNA片段的纯化与大小分选而设计。该磁珠表面羧基修饰丰富，能够在 PEG 缓冲体系下选择性地结合特定长度的DNA片段，有效去除接头二聚体、引物残留及非特异性扩增产物，显著提升文库质量。 本产品全面兼容 Illumina、MGI 等主流测序平台建库流程，可与各品牌 DNA 建库试剂盒及文献报道的实验方案无缝对接，操作流程与同类进口产品完全一致。文库产量、片段大小分布及回收率均与国际标准产品高度一致，可实现直接替代。同时，该磁珠批次稳定性好、磁响应迅速，既可手动操作，也适配自动化工作站。在保证优异纯化效果的前提下，能够有效降低建库成本，是 NGS 文库构建经济可靠的选择。
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GeneRulor NGS DNA纯化磁珠
1. DNA纯化
（1）将磁珠液提前30 min从2～8 ℃取出，静置使其温度平衡至室温。
（2）颠倒或旋涡振荡使磁珠液充分混匀，根据表1吸取适量磁珠液加入 DNA 样品中，使用移液器轻轻吸打10次充分混匀。
（3）室温孵育10 min，使 DNA 结合到磁珠上。
（4）将样品置于磁力架上，待溶液澄清后（约5 min），小心移除上清。
（5）保持样品始终处于磁力架上，加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 sec，小心移除上清。
（6）重复步骤5一次，总计漂洗两次。
（7）保持样品始终处于磁力架上，室温下开盖干燥磁珠约5-10 min。
（8）将样品从磁力架上取出，加入适量无核酸酶水，涡旋振荡或使用移液器吹打充分混匀，室温静置2 min。在磁力架上静置5 min待溶液澄清后，小心吸取上清至一个新的无核酸酶离心管中。
2. DNA纯化条件参考
纯化所得片段大小范围 | 参考纯化磁珠用量(磁珠体积用量：样品体积) |
≥1 kb | 0.5× |
≥400 bp | 1.0× |
≥300 bp | 1.2× |
≥200 bp | 1.5× |
≥100 bp | 2.0×-3.0× |
图1. 不同磁珠用量对应的回收100 bp marker 结果图
3. DNA片段分选
（1）将磁珠液提前30 min 从2～8 ℃取出，静置使其温度平衡至室温。
（2）旋涡振荡使磁珠液充分混匀，按照分选条件说明吸取适量体积磁珠液（第一轮分选，参考表2）加入纯化后的 DNA 处理样品中，使用移液器轻轻吸打10次充分混匀。
（3）室温孵育10 min，使 DNA 结合到磁珠上。
（4）将样品置于磁力架上，待溶液澄清后（约5 min），小心吸取上清至一个新的无核酸酶离心管中。 注意：转移上清时，建议残留2 μL液体于管底，避免吸到磁珠并影响分选效果。
（5）加入适量磁珠液（第二轮分选，参考表2），使用移液器吸打10次充分混匀。
（6）室温孵育10 min，使DNA结合到磁珠上。
（7）将样品置于磁力架上，待溶液澄清后（约5 min），小心移除上清。
（8）保持样品始终处于磁力架上，加入200 μL 新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 sec，小心移除上清。
（9）重复步骤8一次，总计漂洗两次。
（10）保持样品始终处于磁力架上，室温下开盖干燥磁珠约5-10 min。
（11）将样品从磁力架上取出，加入适量无核酸酶水，涡旋振荡或使用移液器吹打充分混匀，室温静置2 min。在磁力架上静置5 min，待溶液澄清后，小心吸取上清至一个新的无核酸酶离心管中。
4. DNA片段分选参考条件
分选片段平均长度（bp） | 250-350 | 320-420 | 450-550 | 550-700 | 700-900 | 800-1000 |
第一次体积比（磁珠:DNA） | 0.80× | 0.70× | 0.60× | 0.55× | 0.50× | 0.45× |
第二次体积比（磁珠:DNA） | 0.20× | 0.20× | 0.20× | 0.15× | 0.15× | 0.15× |
图2. Agilent 2100 high sensitivity DNA chipelectopherogram Smear fragments 溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠进行片段分选