PE2先导编辑核酸酶
产品介绍
PE2（Prime Editor 2）是革命性的先导编辑系统核心组件，由SpCas9(H840A)切口酶与经过优化的莫洛尼小鼠白血病病毒逆转录酶（M-MLV RT）融合而成，实现了无需DNA双链断裂即可进行精准基因编辑的能力。该蛋白的Cas9部分携带H840A点突变，特异性失活HNH核酸酶结构域而保留RuvC活性，因此仅切割与sgRNA非互补的靶链DNA，产生精确的单链切口。融合的M-MLV逆转录酶则经过五处关键氨基酸替换优化，显著提升了其热稳定性、加工能力和模板结合亲和力。
该系统可完成所有12种单碱基替换类型以及小片段DNA的精确插入或删除，整个过程既不需要产生危险的DNA双链断裂，也不依赖外源供体DNA模板，显著降低了脱靶风险和染色体重排可能性。相比第一代PE1，PE2通过逆转录酶的蛋白工程优化，编辑效率提升了2.3-5.1倍，为先导编辑技术在基础研究、基因治疗和作物育种等领域的广泛应用奠定了重要基础。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~172 kDa |
浓度 | 20μM |
PAM序列 | 5'-NGG-3' |
突变位点 | H840A |
激活结构域 | M-MLV RTase |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 50 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% NP-40，50% Gly |
10 x 反应缓冲剂 | 500mM Tris-HCl，750mM KCl，30mM MgCl2,100mM DTT，pH8.3 |
储存条件 | -80°C长期保存，-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
100pmol | GR100601 | 20μM | 5μL |
500pmol | GR100602 | 20μM | 25μL |
2500pmol | GR100603 | 20μM | 125μL |
应用场景
精确点突变校正：校正致病性单核苷酸变异
小片段插入：插入小标签序列或调控元件
精确删除：移除小片段有害序列
疾病建模：精确引入疾病相关突变
功能研究：研究特定突变的生物学效应
基因治疗前研究：临床前遗传病校正研究
参考文献
1. Anzalone AV, et al. (2019). Search-and-replace genome editing without double-strand breaksor donor DNA. Nature. 576(7785):149-157.
2. Chen PJ, et al. (2021). Enhanced prime editing systems by manipulating cellular determinantsof editing outcomes. Cell. 184(22):5635-5652.