AsCas12a核酸酶

产品介绍

AsCas12a是源自氨基酸球菌属细菌BV3L6的V-A型CRISPR核酸酶，与LbCas12a同属Cas12a家族但来自不同细菌物种，在基因组编辑领域展现出独特优势。该蛋白通过单一RuvC核酸酶结构域实现双链DNA切割，采用顺序切割机制：首先切割非靶链，再切割靶链，最终产生约5 nt的5'突出粘性末端，这一特征使其在定向基因插入等应用中具有特殊价值。

AsCas12a识别富T的PAM序列5'-TTTV-3'（V代表A、C或G），这一特性使其能够有效靶向SpCas9难以覆盖的AT富集基因组区域，扩展了全基因组的可编辑范围。研究表明，AsCas12a在哺乳动物细胞中表现出出色的编辑效率和高度特异性，在某些靶位点上其编辑效率甚至高于应用最广泛的LbCas12a，这使其成为研究者进行靶点选择时的重要补充工具。

与所有Cas12a家族成员一样，AsCas12a也具有独特的crRNA加工能力——它既能作为核酸酶切割靶DNA，也能作为核糖核酸酶对crRNA前体进行加工成熟，这一特性简化了多重基因编辑系统的设计。此外，AsCas12a同样保留了trans切割活性：在特异性识别并切割靶标DNA后，其核酸酶结构域被激活，可非特异性切割体系中的任意单链DNA分子，这一特性已被开发为高灵敏度核酸检测平台如DETECTR，在病原体快速检测等领域展现出广阔应用前景。AsCas12a的多样化特性使其成为基因组工程和分子诊断工具箱中不可或缺的重要成员。