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dPspCas13b-ADAT2 nuclease

dPspCas13b-ADAT2 RNA编辑核酸酶

产品介绍

dPspCas13b-ADAT2是一种基于CRISPR技术的RNA编辑工具,属于REPAIR(RNA Editing for Programmable A to I Replacement)系统的核心组件。该融合蛋白由催化失活的Prevotella sp. P5-125 Cas13b(dPspCas13b)与腺苷脱氨酶ADAT2结构域融合而成,实现了RNA层面的精准碱基编辑,为纠正致病性RNA突变提供了全新策略。

Cas13b属于VI-B型CRISPR效应蛋白,其天然功能是靶向并结合RNA分子。通过引入关键突变失活其HEPN核酸酶结构域,dPspCas13b完全丧失了RNA切割活性,但完整保留了由CRISPR RNA(crRNA)引导特异性结合目标RNA序列的能力,成为一个精准的RNA靶向平台。ADAT2是一种腺苷脱氨酶,在自然界中参与tRNA的修饰,能够催化腺苷(A)发生水解脱氨反应转化为肌苷(I)。由于肌苷在翻译过程中被核糖体识别为鸟苷(G),因此A-to-I的编辑实质上实现了A-to-G的功能性改变。

当crRNA引导dPspCas13b-ADAT2结合至目标转录本时,ADAT2在局部对特定位置的腺苷进行脱氨编辑,从而实现RNA序列的精准重编码。


产品参数

参数

规格

来源

大肠杆菌重组表达

分子量

~150 kDa

浓度靶标类型

20μM

靶标类型

RNA

编辑类型

A-to-I (功能等同于A-to-G)

PFS要求

无严格限制

纯度

≥95% (SDS-PAGE)

内毒素

<1 EU/μg

储存缓冲液

50 mM Tris-HCl,300 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,50% Gly

10 x 反应缓冲剂

50mM Tris-HCl,100mM NaCl,10mM MgCl2,100 μg/ml BSA,pH7.9

储存条件

-80°C长期保存,-20°C短期保存


产品规格

规格

货号

浓度

体积

100pmol

GR101301

20μM

5μL

500pmol

GR101302

20μM

25μL

2500pmol

GR101303

20μM

125μL

应用场景

应用场景RNA水平突变校正:修复致病性RNA突变而不影响基因组

可逆性基因调控:暂时性修改RNA信息

蛋白功能调控:通过RNA编辑改变蛋白序列

疾病机制研究:研究RNA编辑在疾病中的作用

非分裂细胞编辑RNA编辑不依赖细胞分裂

参考文献

1. Cox DBT, et al. (2017). RNA editing with CRISPR-Cas13. Science. 358(6366):1019-1027.

2. Abudayyeh OO, et al. (2019). A cytosine deaminase for programmable single-base RNAediting. Science. 365(6451):382-386