dPspCas13b-ADAT2 RNA编辑核酸酶
产品介绍
dPspCas13b-ADAT2是一种基于CRISPR技术的RNA编辑工具,属于REPAIR(RNA Editing for Programmable A to I Replacement)系统的核心组件。该融合蛋白由催化失活的Prevotella sp. P5-125 Cas13b(dPspCas13b)与腺苷脱氨酶ADAT2结构域融合而成,实现了RNA层面的精准碱基编辑,为纠正致病性RNA突变提供了全新策略。
Cas13b属于VI-B型CRISPR效应蛋白,其天然功能是靶向并结合RNA分子。通过引入关键突变失活其HEPN核酸酶结构域,dPspCas13b完全丧失了RNA切割活性,但完整保留了由CRISPR RNA(crRNA)引导特异性结合目标RNA序列的能力,成为一个精准的RNA靶向平台。ADAT2是一种腺苷脱氨酶,在自然界中参与tRNA的修饰,能够催化腺苷(A)发生水解脱氨反应转化为肌苷(I)。由于肌苷在翻译过程中被核糖体识别为鸟苷(G),因此A-to-I的编辑实质上实现了A-to-G的功能性改变。
当crRNA引导dPspCas13b-ADAT2结合至目标转录本时,ADAT2在局部对特定位置的腺苷进行脱氨编辑,从而实现RNA序列的精准重编码。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~150 kDa |
浓度靶标类型 | 20μM |
靶标类型 | RNA |
编辑类型 | A-to-I (功能等同于A-to-G) |
PFS要求 | 无严格限制 |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 50 mM Tris-HCl,300 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,50% Gly |
10 x 反应缓冲剂 | 50mM Tris-HCl,100mM NaCl,10mM MgCl2,100 μg/ml BSA,pH7.9 |
储存条件 | -80°C长期保存,-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
100pmol | GR101301 | 20μM | 5μL |
500pmol | GR101302 | 20μM | 25μL |
2500pmol | GR101303 | 20μM | 125μL |
应用场景
应用场景RNA水平突变校正:修复致病性RNA突变而不影响基因组
可逆性基因调控:暂时性修改RNA信息
蛋白功能调控:通过RNA编辑改变蛋白序列
疾病机制研究:研究RNA编辑在疾病中的作用
非分裂细胞编辑:RNA编辑不依赖细胞分裂
参考文献
1. Cox DBT, et al. (2017). RNA editing with CRISPR-Cas13. Science. 358(6366):1019-1027.
2. Abudayyeh OO, et al. (2019). A cytosine deaminase for programmable single-base RNAediting. Science. 365(6451):382-386