SaCas9核酸酶
产品介绍
SaCas9核酸酶源自金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），是目前应用最广泛的小型Cas9同源物之一，在基因治疗领域具有特殊价值。该蛋白由1053个氨基酸组成，分子量约120 kDa，相比SpCas9（1368氨基酸）缩小了约25%。
SaCas9识别5'-NNGRRT-3'的PAM序列（R代表A或G），相较于SpCas9的NGG PAM更长且更复杂。这种较长的识别序列从理论上可提高靶向特异性，降低脱靶风险，因为基因组中出现完全匹配的位点概率更低。研究表明，SaCas9在哺乳动物细胞中表现出强大的编辑活性，其切割效率可与SpCas9相当甚至更优。
SaCas9还具有独特的酶学动力学特性——与SpCas9的单周转切割模式不同，SaCas9表现出多周转酶活性。这意味着在特定条件下，单个SaCas9酶分子可连续结合并切割多个底物DNA分子，这种特性可能有助于提高其在低浓度或有限递送条件下的编辑效率。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~120 kDa |
浓度 | 20μM |
PAM序列 | 5'-NNGRRT-3' (R=A/G) |
切割位点 | PAM上游3bp |
切割产物 | 平末端DSB |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 50 mM Tris-HCl，300 mM NaCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，50% Gly |
10 x 反应缓冲剂 | 50mM Tris-HCl，100mM NaCl，10mM MgCl2,100 μg/ml BSA，pH7.9 |
储存条件 | -80°C长期保存，-20°C短期保存 |
产品规格
| 规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
| 100pmol | GR101401 | 20μM | 5μL |
| 500pmol | GR101402 | 20μM | 25μL |
| 2500pmol | GR101403 | 20μM | 125μL |
应用场景
AAV介导的体内基因编辑：小体积适合单AAV载体递送
基因治疗：眼科疾病、神经退行性疾病等AAV基因治疗
组织特异性编辑：与AAV结合实现组织靶向
双切又酶策略：SaCas9 D10A/N580A切口酶配对使用
正交编辑：与SpCas9联合使用进行双基因编辑
参考文献
1. Ran FA, et al. (2015). In vivo genome editing using Staphylococcus aureus Cas9. Nature.520(7546):186-191.
2. Nishimasu H, et al. (2015). Crystal structure of Staphylococcus aureus Cas9. Cell.162(5):1113-1126.
3. Friedland AE, et al. (2015). Characterization of Staphylococcus aureus Cas9: a smaller Cas9for all-in-one adeno-associated virus delivery and paired nickase applications. Genome Biol.16:257.