IscB核酸酶
产品介绍
IscB（insertion sequences Cas9-like OrfB）是编码于IS200/IS605转座子家族中的RNA引导型DNA核酸酶，被认为是CRISPR-Cas9系统的进化祖先。该蛋白属于OMEGA（Obligate Mobile Element-Guided Activity）系统家族，其发现为理解CRISPR-Cas系统的分子进化提供了重要线索。
IscB蛋白仅由约400个氨基酸组成，分子量显著小于典型的Cas9蛋白（1000-1400 aa），这主要是因为其缺少了Cas9中负责识别功能的α-螺旋识别叶（REC lobe）。尽管体积小巧，IscB保留了与Cas9相似的核心核酸酶结构域，包括RuvC和HNH结构域，分别负责切割DNA双链的两条链。此外，IscB还包含N端的PLMP结构域和C端的TAM相互作用结构域（TID）。
IscB与其同源的ωRNA形成核糖核蛋白复合物发挥作用。ωRNA是一种约200-400 nt的非编码RNA，比Cas9的crRNA:tracrRNA双链系统更大。冷冻电镜结构解析显示，ωRNA的大型支架在结构和功能上补偿了IscB缺失的REC叶，参与引导RNA-靶DNA异源双链的识别，这是IscB系统最独特的进化适应机制。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
系统类型 | OMEGA系统 |
分子量 | ~45 kDa |
浓度 | 20μM |
TAM序列 | 因IscB变体⽽异 |
核酸酶结构域 | RuvC + HNH |
ωRNA长度 | ~200-400 nt |
纯度 | ≥85% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 20 mM Tris-HCl，500 mM NaCl，0.1 mM EDTA，2 mM DTT，50% Gly，pH8.0 |
10 x 反应缓冲剂 | 20mM Tris-HCl，60mM NaCl，10mM MgCl2，0.4 mM DTT，pH7.9 |
储存条件 | -80°C长期保存，-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
100pmol | GR101501 | 20μM | 5μL |
500pmol | GR101502 | 20μM | 25μL |
2500pmol | GR101503 | 20μM | 125μL |
应用场景
超小型基因编辑器开发：作为开发紧凑型编辑工具的起点
进化研究：研究CRISPR系统的进化起源
新型递送策略：小体积适合多种递送系统
基础机制研究：RNA引导核酸酶的结构-功能关系
生物技术工具开发：工程化改造以优化编辑性能
参考文献
1. Altae-Tran H, et al. (2021). The widespread IS200/IS605 transposon family encodes diverseprogrammable RNA-guided endonucleases. Science. 374(6563):57-65.
2. Kato K, et al. (2022). Structure of the IscB–ωRNA ribonucleoprotein complex, the likelyancestor of CRISPR-Cas9. Nat Commun. 13:6719.
3. Schuler G, et al. (2022). Structural basis for RNA-guided DNA cleavage by IscB-ωRNA andmechanistic comparison with Cas9. Science. 376(6600):1476-1481.