E.coli Exonuclease I（Exo I）
产品介绍
Exo I（核酸外切酶I）是一种源自大肠杆菌的镁离子依赖性核酸外切酶，在分子生物学研究中发挥着基础性作用。该酶由475个氨基酸组成，分子量约为54.5 kDa，其三维结构呈现独特的“C”形构象，包含三个主要结构域：N端外切酶活性结构域、SH3结构域和C端α-螺旋结构域。活性中心位于带正电的凹槽内，能够特异性识别并牢固结合单链DNA（ssDNA）底物，为高效催化提供结构基础。
Exo I具有明确的3'→5'方向性外切酶活性，能够从单链DNA的3'羟基末端逐步水解磷酸二酯键，释放5'单磷酸脱氧核糖核苷酸，并保留完整的5'端二核苷酸。其催化效率极高，水解速率可达每秒约275个碱基，且对高盐环境具有良好的耐受性，这使得它在多种反应条件下都能保持稳定活性。值得注意的是，Exo I对单链DNA具有高度特异性，对双链DNA或RNA几乎没有活性，这一特性使其在选择性去除单链DNA污染或处理特定DNA结构时极为有用。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~55 kDa |
浓度 | 20000 units/ml |
活性 | 3'→5' 单链核酸外切活性 |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 10 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，0.5 mM EDTA，5 mM β-ME，100 µg/ml BSA，50% Gly，pH 7.5 |
10 x 反应缓冲剂 | 670 mM Glycine-KOH，67 mM MgCl2,100 mM β-ME，pH9.5 |
储存条件 | -80°C长期保存，-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
1000U | GR300101 | 20000U/mL | 50μL |
5000U | GR300102 | 20000U/mL | 250μL |
10000U | GR300103 | 20000U/mL | 500μL |
应用场景
PCR产物纯化与测序前处理：Exo I广泛应用于清除PCR反应中的残留引物，因其特异性降解ssDNA的特性，可高效去除未结合的引物（含3’羟基末端），提升测序模板质量。此方法在二代和三代测序技术中尤为关键。
分子诊断与生物传感器：Exo I在电化学生物传感器中用于信号放大。例如，结合核酸适体和纳米银探针，通过Exo I循环剪切ssDNA，显著提升对靶分子（如肿瘤标志物）的检测灵敏度。此技术具有免标记、高稳定性的优势。
参考文献
1. Wendy A. B, et al. (2000). Structure of Escherichia coli exonuclease I suggests how processivity is achieved. Letter. 7(12):1125-8