Uracil-DNA Glycosylase (UDG)
产品介绍
Uracil-DNA Glycosylase（UDG），即尿嘧啶-DNA糖基化酶，是DNA碱基切除修复（BER）途径中第一个关键酶，在维持基因组完整性和分子生物学实验中发挥着重要作用。
UDG具有高度特异性底物识别能力，能够精准识别DNA链中由dUTP掺入或胞嘧啶自发脱氨产生的尿嘧啶碱基。其作用机制是水解尿嘧啶与脱氧核糖之间的N-糖苷键，释放游离尿嘧啶，同时在DNA骨架上形成一个无碱基位点（AP位点）。这一过程不需要辅助因子，且催化效率极高。UDG对RNA链中的尿嘧啶或双链DNA中错配的其他碱基均无活性，确保其只作用于正确的修复目标。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~29 kDa |
浓度 | 5000 units/ml |
活性 | 糖基化酶活性 |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.5 mM EDTA，1 mM DTT，100 µg/ml BSA，50% Gly，pH 7.5 |
10 x 反应缓冲剂 | 200 mM Tris-HCl，10 mM DTT,10 mM EDTA，pH 8 |
储存条件 | -80°C长期保存，-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
250U | GR300201 | 5000U/mL | 50μL |
1250U | GR300202 | 5000U/mL | 250μL |
2500U | GR300203 | 5000U/mL | 500μL |
应用场景
PCR污染控制：UDG在PCR实验中最主要的应用是防止气溶胶污染。通过以dUTP替代dTTP掺入扩增产物，UDG可选择性降解含dU的污染物，而天然DNA模板（含dT）不受影响。此技术广泛应用于qPCR、RT-qPCR等检测体系，尤其在临床核酸检测（如新冠病毒）中显著降低假阳性风险。
USER克隆（Uracil特异性切除试剂）：UDG与核酸内切酶VIII.联用，可在dU位点产生黏性末端，简化载体与插入片段的定向连接，用于构建质粒或TALE蛋白组装。
链特异性RNA文库构建：通过dUTP标记第二链cDNA，UDG处理可选择性去除非目标链，保留链特异性信息，提高转录组分析的准确性。
参考文献
1. Jacob L.P., et al. (2021). The N-terminal domain of uracil-DNA glycosylase: Roles for disordered regions. DNA Repair (Amst) . 101:103077.