pA-GpC甲基转移酶(pA-M.CviPI)
产品介绍
GpC 甲基转移酶(M.CviPI)是一种来源于小球藻病毒(Chlorella virus P1)的DNA甲基转移酶,属于5-甲基胞嘧啶(5mC)修饰酶家族。该酶最初从NYs-1株小球藻病毒中克隆鉴定,其基因编码的天然蛋白由362个氨基酸组成,分子量约为41.9 kDa。
M.CviPI最显著的特性在于其独特的识别特异性——能够精准识别DNA序列中的GpC二核苷酸(即5"-GpC-3"位点),并将该位点的胞嘧啶(C)甲基化为5-甲基胞嘧啶(5mC)。与真核生物中常见的CpG甲基化不同,这种GpC甲基化模式在人类基因组中天然不存在,因此检测时无内源性背景干扰,使其成为染色质结构分析的理想工具。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~42 kDa |
浓度 | 4000 units/ml |
活性 | DNA的甲基化修饰 |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 15 mM Tris-HCl,200 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,200 µg/ml BSA,50% Gly,pH 7.4 |
10 x 反应缓冲剂 | 500 mM Tris-HCl,500 mM NaCl,100 mM DTT,pH 8.5 |
储存条件 | -80°C长期保存,-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
200U | GR300301 | 4000U/mL | 50μL |
1000U | GR300302 | 4000U/mL | 250μL |
2000U | GR300303 | 4000U/mL | 500μL |
应用场景
DNA物理特性与结构研究:
Z-DNA抑制:甲基化后的GC序列可降低Z-DNA形成的自由能,影响DNA的螺旋程度和动力学特性。
测序优化:在化学测序中,5-甲基胞嘧啶对联氨的反应性降低,便于确定甲基化位点。
基因组DNA甲基化与表观遗传学研究:M.CviPI广泛用于基因组DNA的体外甲基化修饰,支持甲基化对基因表达调控的研究。
例如,通过甲基化全基因组DNA后结合高通量测序,可分析甲基化模式与疾病的关系。
分子克隆与限制性酶切保护:甲基化修饰可阻断含GC序列的限制酶(如HaeIII)的切割作用,适用于质粒构建或PCR产物处理中避免非特异性切割。
生物传感器与标记技术:结合[³H]标记技术,M.CviPI可实现DNA的均一标记,用于放射性示踪或分子互作研究。
参考文献
1. Walter J.J., et al. (2004). Mapping chromatin structure in vivo using DNA methyltransferases. Methods. 33(1):68-80.