集胞藻基因组改造
集胞藻PCC 6803作为原核藻类基因编辑的黄金模式生物，基因编辑后可高效调控代谢通路，广泛应用于生物医药、医疗辅料及精准诊断领域。核心应用包括：肿瘤辅助治疗相关抗氧化成分（类胡萝卜素）规模化制备、医疗级酶制剂（如抗氧化酶）定向合成、诊断试剂用功能蛋白高效表达，同时可作为基因编辑技术研发的模式菌株，助力科研机构开展原核藻类基因调控机制研究。
核心采用CRISPR-Cas9/Cas12a编辑系统，结合同源重组技术，适配集胞藻PCC 6803清晰的遗传背景，流程标准化、可复制：①靶点设计与sgRNA合成：结合菌株基因组序列，精准设计特异性sgRNA，依托舒桐医疗高通量sgRNA筛选平台，筛选脱靶率最低的靶点；②载体构建：将sgRNA与Cas蛋白基因、同源臂片段（敲入/敲除片段）构建至适配载体，确保载体高效转化；③菌株转化：采用电穿孔法，将重组载体导入集胞藻细胞，实现载体高效整合；④阳性克隆筛选：通过抗性筛选+PCR验证，筛选出成功编辑的阳性菌株；⑤脱靶检测与验证：利用舒桐医疗核心脱靶检测技术，确认无脱靶风险，同时通过测序验证编辑准确性；⑥规模化培养：优化培养条件，实现阳性菌株规模化扩增，保障产物稳定积累。
集胞藻基因编辑改造策略[1]
服务类型
聚焦客户核心需求，提供全流程定制化服务，涵盖：①基因敲除服务：定向敲除无关代谢基因，提升目标产物积累量；②基因敲入服务：定向敲入外源功能基因（如医疗用酶基因、活性物质合成基因）；③多基因调控服务：批量编辑多个靶点，实现代谢通路精准调控；④菌株改造优化：对现有编辑菌株进行二次优化，提升产物表达量与稳定性；⑤科研级/工业级菌株定制：根据客户研发或生产需求，定制专属编辑菌株。
技术优势
依托菌株特性与舒桐技术积淀，核心优势突出：
①编辑效率高：结合优化后的CRISPR-Cas12a系统，编辑效率可达95%以上，远超行业平均水平；
②脱靶率极低：搭配舒桐自主脱靶检测技术，可精准检测全基因组脱靶位点，确保编辑安全性；
③周期短：标准化流程加持，单个靶点编辑周期40-60天；
④转化效率高：适配电穿孔转化技术，菌株转化效率达90%以上，减少筛选成本；
⑤可规模化：编辑菌株可快速实现规模化培养，适配工业级生产需求；
⑥技术成熟：依托Nature Communications、ACS Synthetic Biology等经典文献技术成果，编辑体系经过长期验证，稳定性强。
项目周期及交付标准
项目周期：根据服务类型灵活调整，①单个靶点敲除/敲入：40-60天；②多基因调控（2-3个靶点）：60-80天；③菌株定制与优化：60-80天；④规模化培养服务：根据培养量，20-30天（可与编辑服务同步进行）。
交付标准：①实物交付：阳性菌株（冻干粉+液体种子液）、规模化培养物（按需）；②技术资料交付：靶点设计报告、sgRNA序列、载体构建图谱、转化与筛选记录、PCR验证报告、脱靶检测报告、测序报告、培养条件说明书；③售后保障：提供1对1技术指导，解答菌株培养、编辑后续应用相关疑问，必要时提供二次优化支持。
参考文献
[1] Cengic, I., Canadas, I. C., Minton, N. P.,& Hudson, E. P. (2022). Inducible CRISPR/Cas9 Allows for Multiplexed andRapidly Segregated Single-Target Genome Editing in Synechocystis Sp. PCC 6803.ACS Synthetic Biology, 11(10), 3100-3113.