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LvNP载体定制

LvNP载体定制


1. 概念：以“病毒级效率×蛋白级安全性”重新定义CRISPR递送方式

LvNP（Lentiviral Nanoparticle）基因编辑平台是一种将Cas9 RNP以病毒样纳米颗粒形式精准递送至细胞的新一代技术。它结合了慢病毒的卓越进入效率与蛋白递送的高安全性，实现高效、瞬时、无整合、无DNA的基因编辑递送方式。其核心优势在于：

  • 比慢病毒更安全：无DNA、无整合、无持续表达

  • 比电转更便捷：无需设备、对细胞更温和

  • 比LNP更高效：适用细胞范围更广、编辑效率更高

  • 比质粒更精准：瞬时编辑、窗口短、脱靶风险低

图 1. LvNP 结构示意图及产品特性


2. 应用场景

2.1 细胞治疗

LvNP可同时递送RNP+功能性mRNA，高度适合免疫细胞工程改造：

  • CAR-T构建：递送CAR mRNA + CRISPR RNP（如TRAC KO）；

  • TCR-T构建：通过RNP实现TCR序列引入与内源TCR敲除；

  • NK细胞工程化：用于增强杀伤、改善代谢、提高持久性。

2.2 基因治疗

LvNP兼具高效递送、低整合风险、可控剂量，是理想的基因治疗工具：

  • 遗传病基因纠错（体外HSC/iPSC编辑；体内局部递送）；

  • 癌症基因治疗（调控免疫微环境）；

  • 基因修复与模型构建。

2.3 干细胞研究与工程

LvNP尤其适合iPSC与造血干细胞（HSC）等难转染细胞。

  • 干细胞基因修饰与基因纠错；

  • iPSC复杂编辑（多基因敲除/敲入）；

  • 干细胞治疗模型开发。

2.4 基因编辑与基因功能研究

LvNP凭借“无整合+高效率”的特性广泛用于研究端基因操作，包括：

  • 基因敲除/敲入/点突变研究：精准递送Cas9 RNP实现快速基因编辑；

  • 基因功能验证：适合细胞发育、疾病模型、调控机制研究；

  • 表观遗传与通路解析：瞬时编辑减少背景表达干扰，更易解析因果关系。


3. 核心技术优势：高效递送+瞬时编辑+卓越安全性+低免疫刺激

3.1 病毒级递送效率，覆盖多类难感染细胞

LvNP保留慢病毒天然的细胞进入优势，对以下细胞表现出行业领先的转导能力：

  • 原代细胞；

  • T细胞/NK细胞；

  • iPSC、HSC等干细胞；

  • 神经元与神经前体细胞；

  • 贴壁/悬浮难感染细胞系。

3.2 瞬时编辑，高精度、低脱靶

Cas9 RNP不需要在细胞内转录或翻译，进入后立即启动编辑，编辑窗口短，背景噪音低：

  • 更低脱靶风险；

  • 更清晰的编辑结果；

  • 更高的基因敲除/敲入效率

3.3 零整合、零持久表达的顶级安全性

LvNP不含基因组，不产生整合事件，是真正意义上的无DNA递送方式：

  • 不进入宿主基因组；

  • 不持续表达Cas9；

  • 不带来潜在突变负担。

3.4 更低免疫刺激，适合体内递送和长期研究

相比其他病毒或脂质体方式：

  • 免疫原性显著更低；

  • 适合体内模型；

  • 适用于对“免疫安全性”要求高的项目。

3.5 广谱兼容性

支持多种基因编辑工具：

  • Cas9（SpCas9、SaCas9等）；

  • Cas12a/ Cas13系列；

  • 支持递送 mRNA + RNP 的复合策略 。


4. 实例展示

       在HEK293T细胞中同时递送针对VEGFA和ARHGAP32的两个RNP，48小时内双位点均出现显著的编辑效果。

LVNP-2RNP.png

图2. LvNP包装多个RNP

10uL LvNP感染jurkat细胞后，48h检测VEGFA靶点的编辑，编辑效果超过80%，比电转效率更高。

LVNP-JURKAT.png

图3. LvNP包装、感染不同时间点后检测基因编辑效果图


5. 技术服务与合作

我们提供从设计到验证的完整LvNP基因编辑服务体系：

5.1 LvNP颗粒定制制备服务

  • 针对不同Cas蛋白/sgRNA的RNP包装；

  • 支持多种基因编辑工具组合；

  • 提供高活性的LvNP成品颗粒。

5.2 Cas9/gRNA项目制套件式服务

  • gRNA靶点设计；

  • 脱靶预测与优化；

  • 载体构建；

  • RNP制备与LvNP包装；

  • 细胞编辑与表型验证；

  • 完整分析与结果报告；

为企业和科研机构提供“一站式基因编辑平台服务”。

5.3 长期合作计划

  • 联合研发；

  • 项目共建；

  • 工艺开发与技术转移。


参考文献

[1] Geilenkeuser J, Armbrust N, Steinmaßl E, etal. Engineered nucleocytosolic vehicles for loading of programmable editors. Cell[J], 2025, 188: 2637-2655.e2631.

[2] Hamilton, J.R., Chen, E., Perez, B.S. etal. In vivo human T cell engineering with enveloped delivery vehicles.Nat Biotechnol 42,1684–1692(2024).

[3] Banskota S, Raguram A, Suh S et al.Engineeredvirus-like particles for efficient in vivo delivery of therapeutic proteins. Cell. 2022, 185(2):250-265.e16.

[4] Xu,D., Besselink, S., Ramadoss, G.N. et al. Programmableepigenome editing by transient delivery of CRISPR epigenome editorribonucleoproteins. Nat Commun 16, 7948 (2025).