腺相关病毒包装（AAV）
1. 服务概述
腺相关病毒（Adeno-Associated Virus, AAV）是一类细小病毒，对于分裂和非分裂细胞均具有感染能力，是目前基因治疗和基因功能研究领域最具应用前景的病毒载体系统。AAV具有安全性高、免疫原性低、组织亲和力强以及体内表达持久等特性。目前，它作为多款获得FDA批准基因治疗产品的核心载体平台。
相比于其他病毒载体，AAV具有很多优势：
扩散性强：AAV体积小，滴度高，与腺病毒和慢病毒相比具有更高的扩散性，可以穿过血脑屏障，是感染神经系统的理想工具；
特异性高：AAV具有多种血清型，不同血清型对不同组织的识别和感染能力不同，是动物实验的首选工具病毒；
安全性高：AAV持续存在于染色体外，降低了突变的风险，且免疫原性低，可以直接用于人体基因治疗。
从实验室到临床：AAV成药里程碑
AAV 的临床价值已被一系列获批产品所证实，市场规模持续高速扩张，适应症持续从罕见遗传病向神经退行性疾病、心血管疾病及肿瘤等更广泛领域延伸，市场爆发潜力巨大。
| 年份 | 产品 | 血清型 / 靶点 | 适应症 & 亮点 | 批准机构 |
| 2019 | Zolgensma | AAV9 (onasemnogene abeparvovec) | 脊髓性肌萎缩症（SMA） 首个全身给药 AAV 基因治疗药物，单次静脉注射实现长期治疗 | FDA |
| 2022 | Hemgenix | AAV5 (etranacogene dezaparvovec) | 成人血友病 B 单次输注后凝血因子 IX 活性维持正常，年出血率大幅下降 | FDA / EMA |
| 2023/24 | Elevidys | AAVrh74 (delandistrogene moxeparvovec) | 杜氏肌营养不良（DMD） 首个商业化微肌营养不良蛋白基因治疗产品 | FDA |
| 2025 | MCO-010 | AAV2 | 视网膜营养不良 首个基因分型无关疗法，通过双极视网膜细胞恢复光敏感性 | FDA（已递交 BLA） |
2. 服务内容
舒桐科技可以提供从AAV质粒设计、构建、包装至表达分析的全套服务。不仅如此，舒桐科技也可以提供全面的AAV载体和表达系统，用于体内和体外表达human/mouse/rat ORFs，lncRNA、circRNA、shRNAs和CRISPR/gRNA。舒桐科技生产的AAV具有滴度高、纯度高和稳定性高的三高优点。下面是AAV从头合成的流程：
图1. AAV生产流程示意图
3. AAV血清型选择指南
AAV 的组织亲嗜性由衣壳蛋白（Capsid）决定，选择正确的血清型是实验成功的关键。舒桐科技覆盖 AAV1–9、AAV-DJ 及多种工程化改造血清型，以下为选型参考：
| 血清型 | 主要靶向组织 | 转导特点 | 典型应用 | 舒桐推荐指数 |
| AAV1 | 骨骼肌、心肌、神经 | 肌肉高效 | DMD、肌病研究 | ★★★★★ |
| AAV2 | 神经、肝脏、视网膜 | 经典型，应用最广 | 视网膜疾病、帕金森 | ★★★★★ |
| AAV5 | CNS、肺、视网膜 | 低免疫原性 | 囊性纤维化、眼科 | ★★★★☆ |
| AAV6 | 心肌、肺、骨骼肌 | 心血管优选 | 心力衰竭、心肌病 | ★★★★★ |
| AAV8 | 肝脏、胰腺、肌肉 | 肝脏效率最高 | 血友病、肝脏代谢病 | ★★★★★ |
| AAV9 | CNS、心脏 | 穿透血脑屏障 | SMA、神经退行性病 | ★★★★★ |
| AAV-DJ | 广谱靶向 | 多组织高效 | 初步研究、不确定靶组织 | ★★★★☆ |
4. 服务套餐与规格
服务类型 | 规格 | 目录价 | 货期 |
AAV过表达 | 滴度≥1×10¹³ vg/mL；体积1ml | 欢迎询价 | 3-5周 |
AAV干扰 | 滴度≥1×10¹³ vg/mL；体积1ml | 欢迎询价 | 3-5周 |
AAV敲除 | 滴度≥1×10¹³ vg/mL；体积1ml | 欢迎询价 | 3-5周 |
5. 服务特色
载体全：多种组织特异性启动子和多种报告基因可供客户选择。
货期短：AAV克隆载体均与我们18,000个预制人源ORF cDNA克隆MCS区通用，行业中生产周期短。
滴度高：可提供10^12VG/ml及以上滴度的病毒，可高达10^14VG/ml。
服务优：可根据客户具体实验，由公司专业技术人员提供载体构建方案，提供特殊定制服务。
6. 常见问题解答 (FAQs)
Q1：如何选择合适的 AAV 血清型？
首要考量目标器官，其次结合给药途径与动物模型（小鼠 vs NHP）：
中枢神经系统（CNS）：AAV9（可静脉给药）、AAV-PHP.eB（小鼠广泛弥散）
肝脏：AAV8
骨骼肌 / 心肌：AAV1、AAV6、AAV9
视网膜：AAV2（玻璃体）、AAV5（视网膜下）
如靶组织不明确，建议先用 AAV-DJ 进行体外预筛。舒桐科技技术团队可根据您的动物模型提供定制化推荐。
Q2：舒桐科技提供的AAV滴度是如何检测的？
我们主要采用 qPCR (定量聚合酶链式反应) 检测 AAV 的基因组滴度(Genome Copies, GC/mL)，引物通常针对 ITR 序列或启动子区，确保结果的通用性与准确性。针对有更高精度要求的临床前研究，我们也提供 ddPCR检测服务，以获得更绝对的滴度定量结果。
Q3：为什么我收到的AAV病毒液有时会出现微量沉淀？
高滴度的AAV在4°C 放置或反复冻融时，可能会由于蛋白浓度过高产生轻微聚集。
建议：收到病毒后，请立即按照单次实验用量进行分装，并储存于 -80°C。使用前在冰上融化，如有沉淀，可进行短暂离心（低速）或轻轻弹混。
Q4：AAV感染后通常需要多长时间观察表达？
AAV 是一种单链 DNA 病毒，进入细胞后需转化为双链 DNA 才能开始转录，且无包膜病毒的脱壳过程较慢。体外细胞：通常在3-7天观察到表达；动物体内：表达高峰通常在注射后的2-4周达到。部分血清型或特殊组织可能需要更长时间。
Q5：舒桐医疗在AAV载体优化方面有什么优势？
舒桐医疗不仅提供标准包装，还具备深度的载体改造能力：
• 组织特异性启动子：如针对神经元的 Syn、针对心肌的 cTnT、针对肝脏的TBG等，减少脱靶表达。
• Cre-LoxP控制：提供 DIO/FLEX 系统，实现对特定细胞群的条件性基因表达。
• 严苛 QC：除滴度外，我们还可进行空壳率检测（TEM 负染或 AUC）、纯度鉴定（SDS-PAGE）及无菌、支原体检测，确保实验结果的可靠性。
Q6：如何运输和储存AAV病毒？
储存：长期储存请置于-80°C（可稳定保存1年以上）。4°C环境下建议存放不超过一周。
运输：我们全程使用干冰冷链运输，并配备温度监控，确保病毒活性不受影响。
参考文献：
[1] Wang, D., Tai, P.W.L., & Gao,G. (2019). Adeno-associated virus vector as a platform for gene therapydelivery. Nature Reviews Drug Discovery, 18, 358–378.
[2] Li, C., & Samulski, R.J.(2020). Engineering adeno-associated virus vectors for gene therapy. NatureReviews Genetics, 21, 255–272.