ΦC31 整合酶（ΦC31 Integrase）
产品介绍
ΦC31 整合酶来源于链霉菌噬菌体 phiC31（Streptomyces phage phiC31）的整合酶，是一种大型丝氨酸重组酶，属于丝氨酸重组酶家族。该酶在噬菌体基因组的整合过程中扮演关键角色，由噬菌体phiC31编码，能够高效催化两个特异性序列——噬菌体基因组中的 attP 位点与宿主细菌染色体中的 attB 位点之间的位点特异性重组。
ΦC31 整合酶最显著的特征在于其独特的重组机制——通过识别和重组两个异型位点 attP 与 attB，生成产物位点 attL 与 attR，后两者不再作为该整合酶的底物，因此整合是单向且几乎不可逆的。这一特性使其区别于 Cre 和 Flp 等经典重组酶（后者识别同型位点），成为基因组定点整合的理想工具。
ΦC31 整合酶由约 68 kDa 的蛋白质组成（编码序列长度约 1.8–2.4 kb）。研究表明，该酶可在原核与真核系统中发挥作用，无需辅助因子即可整合任意大小的质粒（以单拷贝形式），且整合后转基因可持续稳定表达。
产品参数
参数 | 规格 |
来源 | 大肠杆菌重组表达 |
分子量 | ~62 kDa |
浓度 | 2.6mg/ml |
活性 | 介导 attP 与 attB 位点之间的位点特异性重组，实现 DNA 单向整合 |
纯度 | ≥95% (SDS-PAGE) |
内毒素 | <1 EU/μg |
储存缓冲液 | 50 mM Tris-HCl，500 mM NaCl，50% Gly，pH 8.0 |
10 x 反应缓冲剂 | 200 mM Tris-HCl，1 M NaCl，1 mM EDTA，pH 7.5 |
储存条件 | -80°C长期保存，-20°C短期保存 |
产品规格
规格 | 货号 | 浓度 | 体积 |
50μL | GR300401 | 2.6mg/mL | 50μL |
250μL | GR300402 | 2.6mg/mL | 250μL |
500U | GR300403 | 2.6mg/mL | 500μL |
应用场景
定点转基因整合：通过将 attB 位点插入供体质粒、attP 位点整合至宿主基因组，实现单拷贝的定点整合。可整合任意大小的 DNA 片段，是构建稳转细胞系的理想方案。
非病毒基因递送与基因治疗：ΦC31 整合酶可实现无病毒载体的高效基因递送，避免病毒载体的免疫原性和包装限制；在肝、肺、神经干细胞、肌干细胞、脐带上皮细胞及诱导多能干细胞等体系中的临床前研究已取得进展，为基因治疗提供新策略。
微环DNA（Minicircle）制备：在微环DNA技术中，ΦC31 整合酶通过识别 attP/attB 对亲本质粒进行重组整合，产生只包含真核表达元件和目的基因的微环质粒，用于高效、安全的转基因载体构建。
细胞工程与稳转细胞系开发：ΦC31 整合酶应用于 Jump‑In™ 等细胞工程平台，可在两周内完成稳转细胞系的构建，相较于传统方法显著缩短开发周期。结合 R4 整合酶可实现从定义基因组位点的同基因型蛋白表达，适用于基因家族、同源异构体或直系同源物的比较分析。
模式生物基因编辑：ΦC31 整合酶已广泛应用于果蝇等模式生物的定点整合与基因敲除。包含 attP 的“停靠品系”可将 attB 标记的供体 DNA 高效整合至基因组特定位点。
植物合成生物学：ΦC31 整合酶已用于植物记忆开关等合成生物学回路构建，为改造植物性状、引入抗病性及增强营养含量提供工具。
参考文献
1. Groth, A. C., et al. (2000). A phage integrase directs efficient site-specific integration in human cells. Proceedings of the National Academy of Sciences, 97(11), 5995–6000.
2. Thorpe, H. M., & Smith, M. C. (1998). In vitro site-specific integration of bacteriophage DNA catalyzed by a recombinase of the resolvase/invertase family. Proceedings of the National Academy of Sciences, 95(10), 5505–5510.
3. Thyagarajan, B., et al. (2001). Site-specific genomic integration in mammalian cells mediated by phage phiC31 integrase. Molecular and Cellular Biology, 21(12), 3926–3934.
4. Bernabe-Orts, J. M., Quijano-Rubio, A., Vazquez-Vilar, M., et al. (2020). A memory switch for plant synthetic biology based on the phage φC31 integration system. Nucleic Acids Research, 48(6), 3379–3394.